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聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction,PCR）是分子生物學(xué)中基礎(chǔ)且廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一，用于特異性擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。盡管PCR儀和試劑是核心要素，但實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行同樣高度依賴(lài)一系列專(zhuān)用耗材。這些pcr耗材不僅影響反應(yīng)效率和特異性，還直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性...
支鏈兩親性肽膠囊（BAPC）是由兩個(gè)支鏈肽序列bis（FLIVI）-K-KKKK和bis（FLIVIGSII）-K-KKKK的等摩爾比例組成的肽納米球，它們自組裝形成雙層分隔膠囊。在最近的兩篇出版物中，我們描述了BAPC的脂質(zhì)類(lèi)似特征，檢查了它們的初始組裝，融合方式，溶質(zhì)包封和調(diào)整大小，并描述了它們通過(guò)在4°C下儲(chǔ)存來(lái)保持特定尺寸的能力。在本報(bào)告中，我們描述了穩(wěn)定性、尺寸限制BAPC在體內(nèi)的包封，細(xì)胞定位，保留和生物分布。我們的構(gòu)建體能夠保留發(fā)射α粒子的放射性核素而沒(méi)有任何明...
混合支鏈肽組裝的特殊性質(zhì)，其中等摩爾雙（FLIVI）-K-KKKK和雙（FLIVIGSII）-K-KKKK自締形成能夠捕獲溶質(zhì)的雙層分隔膠囊。這些聚陽(yáng)離子囊泡樣膠囊很容易被培養(yǎng)物中的上皮細(xì)胞吸收，逃逸或逃避內(nèi)吞途徑，并積聚在核周區(qū)域，在那里它們持續(xù)存在而沒(méi)有任何明顯的降解。在本報(bào)告中，我們研究了該系統(tǒng)的脂質(zhì)特性，包括初始組裝;溶質(zhì)封裝和洗滌;通過(guò)具有一定孔徑的聚碳酸酯過(guò)濾器進(jìn)行膜擠出進(jìn)行融合和調(diào)整尺寸。調(diào)整大小的肽膠囊在nm尺寸范圍內(nèi)具有均勻的直徑。調(diào)整大小后，膠囊可以通過(guò)將...
基于肽的包裝系統(tǒng)作為更安全的藥物輸送系統(tǒng)顯示出巨大的潛力。它們克服了與基于脂質(zhì)或病毒遞送系統(tǒng)相關(guān)的穩(wěn)定性、特異性、炎癥、抗原性和調(diào)諧能力方面的問(wèn)題。在這里，我們描述了一組15和23殘基支鏈兩親性肽，它們?cè)诜肿咏Y(jié)構(gòu)中模仿磷酸甘油酯。這些肽經(jīng)歷超分子自組裝，并形成溶劑填充的雙層分隔球體，直徑為50-200nm，經(jīng)TEM，STEM和DLS證實(shí)。雖然弱疏水力驅(qū)動(dòng)和維持脂質(zhì)雙層組裝，但這些全肽結(jié)構(gòu)通過(guò)疏水相互作用和氫鍵潛在地穩(wěn)定，并且在低微摩爾濃度和較高溫度下保持完整。缺乏分支點(diǎn)的線(xiàn)性...
哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解物中GFP融合蛋白的免疫沉淀(IP/CoIP)方案該方案旨在對(duì)GFP標(biāo)記的融合蛋白進(jìn)行免疫沉淀，以通過(guò)蛋白質(zhì)免疫印跡或活性測(cè)定進(jìn)行分析。溶液和試劑1X細(xì)胞裂解緩沖液：50mMTris(pH7.5)、150mMNaCl、1mMEDTA、1mMEGTA、1%TritonX-100。建議在使用前添加1mMPMSF。1X洗滌緩沖液：TBS（50mMTrisHCl，150mMNaCl，pH7.5）5XSDS上樣緩沖液1.準(zhǔn)備細(xì)胞裂解物1.要在非變性條件下收獲細(xì)胞，去除培...
基于抗體的蛋白質(zhì)組學(xué)研究的一個(gè)主要問(wèn)題是可以高置信度檢測(cè)靶蛋白的特異性抗體的可用性有限。在A(yíng)biocode，我們致力于在抗體生產(chǎn)方面有所作為。我們生產(chǎn)高度特異性的抗體，可以通過(guò)創(chuàng)新的高通量方法滿(mǎn)足基于蛋白質(zhì)組學(xué)研究的目標(biāo)。對(duì)于每種蛋白質(zhì)，只要有可能，我們都會(huì)制造兩種或兩種以上的不同抗體，這些抗體可以識(shí)別蛋白質(zhì)的不同區(qū)域。此外，我們?cè)O(shè)計(jì)和選擇用于抗體生產(chǎn)的抗原，這些抗原具有最高的特異性和免疫原性。具有多種能夠識(shí)別蛋白質(zhì)不同部分的高度特異性抗體的可用性將為基于抗體的蛋白質(zhì)組學(xué)研究...
CRISPR/Cas9基因編輯是研究新興模式生物遺傳學(xué)的*技術(shù)，如寶石黃蜂納索尼亞維特里彭尼斯.然而，目前涉及胚胎顯微注射CRISPR試劑的方法具有挑戰(zhàn)性。將Cas9核糖核蛋白遞送到雌性卵巢是一種替代方案，僅在少數(shù)昆蟲(chóng)（如蚊子和粉虱）中進(jìn)行了探索。在這里，我們開(kāi)發(fā)了一種通過(guò)在成人中注射Cas9核糖核蛋白來(lái)進(jìn)行種系基因編輯的簡(jiǎn)單方案維特里彭尼斯豬籠草使用ReMOT對(duì)照（受體介導(dǎo)的貨物卵巢轉(zhuǎn)導(dǎo)）或BAPC（支鏈兩親肽膠囊）作為卵巢遞送方法的女性。我們證明了通過(guò)P2C肽和BAPC將...
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