Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，產(chǎn)品型號(hào)：IGY-1910。

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，

儲(chǔ)藏條件 

所有試劑在 4oC 下可穩(wěn)定保存長達(dá) 1 年。 

 一般建議

1. 雞蛋可在 4°C 下長期保存，但建議在使用本試劑盒分離 IgY 之前將雞蛋打碎。分離后的蛋黃可在 4°C 的 0.05% 中儲(chǔ)存數(shù)天，而 IgY 回收率不會(huì)有任何明顯損失。不應(yīng)將蛋黃冷凍儲(chǔ)存以用于此試劑盒。

2. 蛋黃中的脂質(zhì)含量差異很大，有時(shí)破損步驟不會(huì)產(chǎn)生清澈的上清液。在這種情況下，可以添加更多體積的試劑 A 以破壞蛋黃。

IgY 純化試劑盒 - 如何從蛋黃中純化 IgY 抗體

IGY 的分離和純化步驟很簡單，在室溫下進(jìn)行。

1. 使用蛋黃分離器將新鮮雞蛋打碎并分離蛋黃。蛋黃被刺破釋放出蛋黃內(nèi)容物，可以使用牙簽輕松去除膜。

2. 對(duì)于新鮮蛋黃，在持續(xù)攪拌下加入 5 倍體積的試劑 A 的蛋黃重量。注意：如果蛋黃放置 3 天或以上且未冷凍，建議使用 6 倍體積的試劑 A。不建議使用此試劑盒使用冷凍蛋黃。

3. 加入所有試劑后，會(huì)形成濃稠的黃色沉淀。繼續(xù)攪拌 10 分鐘，并將內(nèi)容物在 4 ° C 下孵育過夜。沉淀物將沉淀下來，1-2 小時(shí)內(nèi)可以看到澄清的上清液。

4. 將內(nèi)容物在冷搖擺式離心機(jī)中于 4 ° C以 3500-4000Xg 離心 30 分鐘。

5. 將澄清的上清液倒入預(yù)冷的燒杯中，并在不斷攪拌下緩慢加入等體積的試劑 B。繼續(xù)攪拌 10 分鐘，并將混合物在 4 ° C 下放置 2-4 小時(shí)至過夜。1-2 小時(shí)內(nèi)，底部會(huì)出現(xiàn)透明的白色沉淀物。

6. 將內(nèi)容物在 4°C 下以 4000xg 離心 20 分鐘以收集白色沉淀物。

7.  小心去除所有液體，并使用以下公式在抗體重組緩沖液中重組白色顆粒。對(duì)于 10 克蛋黃，添加 2 至 2.5 毫升的抗體重組緩沖液。

8. 通過在 280 處測量 1:20 稀釋的 OD，按內(nèi)容量化 IgY。 

9. 總 IgY 可按 1:1 的比例保存在抗體穩(wěn)定緩沖液中，可在 -40°C 或以下長期保存。 

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