
生物發(fā)光生物的三類蛋白質(zhì)具有獨特的特性,這些特性作為細胞研究的報告基因、定義代謝途徑以及極為重要的高通量篩選(HTS)非常有用。
熒光素催化熒光素底物(尤其是海腔素)的酶促氧化,并產(chǎn)生該反應的副產(chǎn)物發(fā)光。與第一代螢火蟲熒光素酶系統(tǒng)不同,這些基于海腔enterazine的熒光素酶(NanoLight™)不需要輔助的高能分子如ATP或輔酶A,這大大簡化了它們在多種報告應用中的應用。
其中一種特別小、最小且最亮的發(fā)酵素熒光素酶被稱為Gaussia princeps Luciferase。通過多次出海航行,發(fā)現(xiàn)這些長約5毫米的小型橈足類,它們分布稀疏于700-900米深處。獲得足夠多完好無損的這些橈足類以制作功能性表達克隆庫極其繁瑣且昂貴。
高西亞·露西法拉酶的一個應用是觀察單個神經(jīng)元囊泡釋放,從而可以直接且定量地成像去極化及胰島素及其他融合蛋白的釋放。
光蛋白(Aequorin、Obelin)被海腔素和分子氧“預充電"——當鈣觸發(fā)氧化時,會發(fā)生一道閃光。光蛋白通常需要還原環(huán)境和極低的鈣含量,否則在鈣存在下表現(xiàn)為較差的熒光素酶。
綠色熒光蛋白(NanoFluor™)本質(zhì)上會發(fā)熒光,是由于一種獨特的肽源發(fā)色團,該發(fā)色團在翻譯后自我組裝。GFPs能夠?qū)晒馑孛富蚬獾鞍椎牟ㄩL從藍色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色,這使得在基因表達的全細胞研究以及藥物與靶點相互作用隨時間和可變劑量下可視化等多種用途成為可能。
我們獨特的GFP和熒光素酶特性使公司科學家獲得了一期SBIR測試,以評估BRET(生物發(fā)光能量轉(zhuǎn)移)作為新型生物傳感器的可行性。BRET有望廣泛應用于HTS、醫(yī)學診斷和基礎(chǔ)研究。其獨特優(yōu)勢在于在結(jié)合或接近事件發(fā)生時,能夠同時提供空間和方向信息。
一種notable sea pen GFPPtilosarcus被發(fā)現(xiàn)具有所有熒光蛋白中最高的自然量子效率。Ptilosarcus和Renilla GFP已被Cellomics優(yōu)化并用于高含量篩選,并被分子器件公司和Rigel Pharmaceuticals采用。
納米光技術(shù)認為,基礎(chǔ)研究、藥物發(fā)現(xiàn)和農(nóng)化行業(yè)才剛剛開始利用自然生物發(fā)光的力量進行研究、篩選和發(fā)現(xiàn)工作。
標準光度計可測量的大部分可見光譜仍可利用,納米光™具備開發(fā)生物發(fā)光報告系統(tǒng)的理想位置,并可輕松集成于ELISA檢測系統(tǒng)、直接體內(nèi)成像、細胞追蹤,以及采用多種策略進行DNA-DNA、DNA-RNA和核苷酸-肽檢測,以及分裂熒光素酶技術(shù)。使用納米光技術(shù)生物發(fā)光技術(shù)的、穩(wěn)固且不受現(xiàn)有技術(shù)限制,生命科學公司可以放心。
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